無(wú)縫克隆的10 μl反應體系中,2-3 個(gè)組裝片段總加入量建議在0.03-0.2 pmol,4-6 個(gè)組裝片段總加入量建議在0.2-0.5 pmol。
計算線(xiàn)性化片段(包括載體和插入片段)的使用量,推薦以下計算公式:
線(xiàn)性化片段用量(ng)=皮摩爾數(pmols) × 堿基對數(bp)× 0.65 kDa
注:最優(yōu)反應體系通常含有載體50-100 ng,各插入片段的摩爾數是載體的2-3倍。
任意輸入兩個(gè)參數:線(xiàn)性化片段的用量、pmols數、片段堿基對數,計算第三個(gè)參數結果。
(線(xiàn)性化片段)
(堿基對數)
計算結果 | 線(xiàn)性化片段質(zhì)量 | pmols | 堿基對數 |
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